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Vitronectin 재조합 비트로넥틴 코팅 단백질

Vitronectin · Cat. No. RP01002

hESC·hiPSC를 영양세포 없이 키우기 위한 재조합 사람 비트로넥틴 코팅 단백질입니다. 권장 코팅량은 1 µg/cm²입니다.

Vitronectin 제품 사진
제품 사진 · Shownin 공식 사이트
Shownin · hPSC · 배양 기질 (코팅)
선택Cat. No.판매 단위수량
1 mg (2 mL)
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Shownin 공식 제품 페이지 ↗

개요

Shownin Vitronectin(RP01002)은 재조합 사람 비트로넥틴(vitronectin) 단백질로, 배양 용기 바닥을 코팅해 사람 만능줄기세포(hPSC), 즉 사람 배아줄기세포(hESC)와 사람 유도만능줄기세포(hiPSC)가 붙어 자라게 하는 배양 기질(코팅 단백질)입니다.

NcEpic™ hPSC Medium(SN-01-0010) 또는 NcTarget™ hPSC Medium(RP01020)과 함께 써서 hPSC 확장 배양을 지원합니다(공식 제품 페이지·설명서). 설명서는 이 제품을 화학적 조성 확정(chemically defined), 이종 성분 무첨가(xeno-free) 세포 기질로 소개하며, 다른 hPSC 배지와도 함께 사용할 수 있다고 적습니다.

제품은 500 µg/mL 농도의 용액 2 mL(1 mg)입니다. 6-well plate 1장(60 cm²)에 60 µg(120 µL)을 쓰므로, 120 µL씩 나눠 얼려 두고 1개씩 DMEM/F12에 희석해 씁니다(설명서).

주요 용도

  • 사람 배아줄기세포(hESC)·사람 유도만능줄기세포(hiPSC)의 영양세포 없는(feeder-free) 배양을 위한 배양 용기 코팅
  • NcEpic™ 또는 NcTarget™ hPSC Medium을 쓰는 hPSC 유지·확장·계대 배양
  • hPSC의 성장과 분화를 위한 세포 기질 (설명서)

특징

  • 재조합 사람 단백질(recombinant human protein)입니다(공식 제품 페이지). 설명서 표기는 Truncated VTN-NC입니다.
  • 이종 성분 무첨가(xeno-free)입니다(공식 제품 페이지).
  • 30계대 넘게 세포 안정성을 유지한다고 제조사가 표기합니다(공식 제품 페이지).
  • 순도 95% 이상, 엔도톡신 25 EU/mg 이하 (설명서 표기).
  • 코팅 후 실온에서 1시간 이상 두면 바로 쓸 수 있고, 쓰기 전 추가 세척이 필요 없습니다(설명서).

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
VitronectinRP010021 mg (2 mL)1-80 °C 또는 -20 °C
성분재조합 사람 비트로넥틴 (Truncated VTN-NC, 설명서 표기)
농도500 µg/mL (설명서)
순도95% 이상 (설명서)
엔도톡신25 EU/mg 이하 (설명서)
권장 코팅량1 µg/cm² (설명서)
함께 쓰는 배지NcEpic™ hPSC Medium, NcTarget™ hPSC Medium (공식 제품 페이지·설명서)

사용 방법

함께 준비할 것

나눠 담기

  1. 권장 코팅량은 1 µg/cm²입니다. 6-well plate는 well당 10 cm²로 10 µg, 1장(60 cm²)에 60 µg이 필요합니다.
  2. 60 µg은 원액(500 µg/mL) 120 µL에 해당합니다. 120 µL(60 µg)씩 나눠 담아 -20 °C 또는 -80 °C에 보관합니다.
  3. 필요할 때 1개를 꺼내 6-well plate 1장을 코팅합니다. 다른 용기는 아래 표의 양을 씁니다.
  4. 얼렸다 녹이기를 반복하지 않습니다(NcEpic™ hPSC Medium 설명서).

코팅 (6-well plate 예, 다른 용기도 같은 방법)

  1. Vitronectin 1개(120 µL, 60 µg)를 실온(15–25 °C)에서 녹입니다.
  2. 15 mL 튜브에 DMEM/F12 9 mL를 넣고 녹인 Vitronectin을 옮겨 부드럽게 섞습니다. 볼텍스하지 않습니다.
  3. 희석액은 바로 코팅에 씁니다. 6-well plate에 1.5 mL/well씩 넣습니다.
  4. 판을 부드럽게 기울여 희석액이 바닥 전체를 덮게 합니다.
  5. 실온(15–25 °C)에서 1시간 이상 둔 뒤 씁니다. 바로 쓰지 않으면 밀봉해 4 °C에서 1주 안에 쓰고, 쓰기 전 실온에 10–30분 둡니다.
  6. 세포를 넣기 직전 판을 기울여 피펫 팁으로 코팅액을 뺍니다. 바닥을 긁지 않게 하고, 헹구거나 다른 용액을 더 넣지 않습니다.
  7. 이어서 hPSC 해동·계대는 NcEpic™ 또는 NcTarget™ hPSC Medium 설명서 절차를 따릅니다.
배양 용기별 Vitronectin 사용량 (설명서 표 2)
배양 용기면적Vitronectin 양
6-well plate10 cm²/well10 µg
60 mm 배양 접시20 cm²20 µg
100 mm 배양 접시60 cm²60 µg
T-25 플라스크25 cm²25 µg

권장 코팅량 1 µg/cm² 기준. 6-well plate 1장(60 cm²)은 60 µg = 원액 120 µL (설명서).

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

Vitronectin 코팅 판에서 자란 hiPSC 형태
Vitronectin 코팅 판에서 자란 hiPSC 형태Vitronectin으로 계속 배양한 hiPSC(P20)의 형태입니다. 배지는 NcTarget™ hPSC Medium / NcEpic™ hPSC Medium을 사용했습니다. A, B, C: 각각 배양 1일, 2일, 4일째 hiPSC 형태로, 작은 콜로니가 점점 커져 4일째에는 대부분의 면적을 덮습니다. Scale bar: 200 µm.시험 조건: 세포: hiPSC(P20) / 기질: Vitronectin / 배지: NcTarget™ 또는 NcEpic™ hPSC Medium(어느 것인지 그림 설명에 구분 없음) / 관찰: 배양 1·2·4일 (제조사 시험)
영문 원문 설명

The morphology of hiPSC (P20) cells continuously cultured with Vitronectin, cultured using NcTarget™ hPSC Medium / NcEpic™ hPSC Medium. A, B, and C: Morphology of hiPSCs on days 1, 2, and 4 of culture, respectively. Scale bar: 200 μm.

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • 보관 -80 °C 또는 -20 °C (공식 제품 페이지·설명서)
  • 녹인 뒤에는 4 °C에서 2주까지 두거나, 나눠서 -20 °C/-80 °C에 보관합니다. 얼렸다 녹이기를 반복하지 않습니다(NcEpic™ hPSC Medium 설명서).
  • 코팅한 판은 밀봉해 4 °C에서 1주 안에 씁니다(설명서).

자료 · 영상

사용법 영상 (Shownin 공식 YouTube)

iPSC 배양 — Vitronectin 코팅Shownin iPSC Product System Usage Protocols: Vitronectin YouTube에서 보기

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

인용 논문

  1. Base editing-mediated splicing correction therapy for spinal muscular atrophyXiang Lin, et al. Cell Research, 2020
  2. Embryonic Stem Cell Derived Small Extracellular Vesicles Modulate Regulatory T Cells to Protect against Ischemic StrokeYuguo Xia, et al. ACS Nano, 2020
  3. Inducible Pluripotent Stem Cell-Derived Small Extracellular Vesicles Rejuvenate Senescent Blood-Brain Barrier to Protect against Ischemic Stroke in Aged MiceQing Li, et al. ACS Nano, 2022
  4. ESC-sEVs Rejuvenate Senescent Hippocampal NSCs by Activating Lysosomes to Improve Cognitive Dysfunction in Vascular DementiaGuowen Hu, et al. Advanced Science, 2020
  5. Human ESC-sEVs alleviate age-related bone loss by rejuvenating senescent bone marrow-derived mesenchymal stem cellsLiangzhi Gong, et al. Journal of Extracellular Vesicles, 2020

제조사가 공식 사이트에 공개한 사용 논문 목록입니다.

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