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hPSC 해리 버퍼 (0.5 mM EDTA)

hPSC Dissociation Buffer · Cat. No. RP01007

0.5 mM EDTA가 든 멸균 해리 버퍼로, hPSC를 효소 없이 덩어리째 떼어 계대합니다. 37 °C에서 보통 약 8분이면 해리됩니다.

hPSC Dissociation Buffer 제품 사진
제품 사진 · Shownin 공식 사이트
Shownin · hPSC · 해리 · 계대 시약
선택Cat. No.판매 단위수량
500 mL
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개요

Shownin hPSC Dissociation Buffer(RP01007)는 0.5 mM EDTA가 든 해리 버퍼입니다. 여과 멸균되어 있어 사람 만능줄기세포(hPSC)의 해리에 바로 쓸 수 있습니다(공식 제품 페이지).

사용이 간편하고, 대부분의 hPSC는 37 °C에서 약 8분이면 해리됩니다(공식 제품 페이지). 효소를 쓰지 않고 세포를 작은 덩어리(cluster) 상태로 떼어 내는 계대 방법으로, NcEpic™·NcTarget™ hPSC Medium 설명서의 계대·동결 절차에 이 버퍼가 쓰입니다.

해리 후에는 ROCK 억제제(Blebbistatin 2.5 µM 또는 Y-27632 10 µM)를 넣은 hPSC 완전 배지를 바로 넣어 세포를 떼어 내고 새 코팅 판에 나눠 넣습니다(설명서).

주요 용도

  • 영양세포 없이 배양한 hPSC(hESC, hiPSC)의 덩어리(cluster) 계대
  • hPSC 동결 전 세포 해리 (NcEpic™·NcTarget™ 설명서)
  • NcEpic™ 또는 NcTarget™ hPSC Medium, Matrigel 또는 Vitronectin 코팅 판과 함께 쓰는 계대 절차

특징

  • 0.5 mM EDTA 해리 버퍼로, 여과 멸균되어 바로 쓸 수 있습니다(공식 제품 페이지).
  • 대부분의 hPSC를 37 °C에서 약 8분(설명서 절차 7–8분)에 해리합니다(공식 제품 페이지).
  • 이종 성분 무첨가(xeno-free)입니다(공식 제품 페이지).
  • 화학적 조성 확정(chemically defined)입니다(공식 제품 페이지).
  • 보관 2–8 °C, 유효기간 12개월입니다(공식 제품 페이지·설명서).

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
hPSC Dissociation Buffer (0.5 mM EDTA)RP01007500 mL12–8 °C
성분0.5 mM EDTA (공식 제품 페이지·설명서)
멸균여과 멸균 (공식 제품 페이지)
주요 성분 특성이종 성분 무첨가 · 화학적 조성 확정 (제조사 표기)
해리 조건37 °C, 7–8분 (설명서)
사용량 (6-well plate)2 mL/well (설명서)

사용 방법

함께 준비할 것

EDTA 해리와 계대 (6-well plate 예)

  1. 배양 배지를 빼고 칼슘·마그네슘이 없는 DPBS 2 mL/well을 넣어 가볍게 흔든 뒤 뺍니다.
  2. hPSC Dissociation Buffer 2 mL/well을 넣어 바닥 전체를 덮습니다.
  3. 37 °C 배양기에서 7–8분 둡니다. 판은 배양기 금속 선반에 바로 올려 고르게 데우고, 겹쳐 쌓지 않습니다.
  4. 현미경으로 보아 대부분의 세포가 밝고 둥글어졌지만 아직 바닥에서 떨어지거나 뜨지 않았을 때 해리를 멈춥니다. 변화가 적으면 시간을 늘립니다.
  5. 판을 흔들지 않게 생물안전작업대로 옮겨, 기울여서 해리 버퍼를 뺍니다.
  6. ROCK 억제제(Blebbistatin 2.5 µM 또는 Y-27632 10 µM)를 넣은 미리 데운 hPSC 완전 배지(NcEpic™ 또는 NcTarget™) 2 mL/well을 바로 넣고, 판을 가로·세로로 흔들어 세포를 떼어 냅니다. 피펫팅은 1–2회만 하고 단일세포로 흩지 않습니다.
  7. 세포를 긁지 않습니다. 10–15%가 바닥에 남는 것은 정상입니다. 한 번에 6-well plate 1장만 다루고, 해리 버퍼 처리 시간이 15분을 넘지 않게 합니다.
  8. Matrigel 또는 Vitronectin 코팅 판의 코팅액을 빼고 ROCK 억제제를 넣은 완전 배지 2 mL/well을 넣은 뒤, 정한 계대 비율대로 세포 현탁액을 나눠 넣습니다.
  9. 판을 가로·세로로 3회 흔들어 배양기(37 °C, 5% CO₂)에 넣고 다시 3회 흔듭니다. 18–24시간 뒤 새 완전 배지로 바꾸고, 이후 매일 교체해 4–5일 뒤 계대하거나 수확합니다.
  10. 자세한 절차는 제품 설명서와 NcEpic™·NcTarget™ hPSC Medium 설명서를 확인하세요.

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

해리 시간에 따른 hPSC 변화
해리 시간에 따른 hPSC 변화hPSC Dissociation Buffer로 hPSC를 해리하는 예입니다. (A) EDTA 해리 4분, (B) 6분, (C) 8분. 시간이 지날수록 세포가 점점 밝아지고 둥글어지며, 8분(C)에서 대부분의 세포가 밝고 둥근 상태가 됩니다. 설명서는 이 상태에서 해리를 멈추라고 안내합니다. Scale bar: 200 µm.시험 조건: 세포: hPSC / 해리: hPSC Dissociation Buffer(0.5 mM EDTA), 37 °C / 관찰: 4·6·8분 (제조사 예시 사진)
영문 원문 설명

hPSC Dissociation Buffer Digestion of hPSC Example Image. (A) EDTA dissociation for 4 minutes; (B) EDTA dissociation for 6 minutes; (C) EDTA dissociation for 8 minutes. Scale bar: 200 μm.

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • 보관 2–8 °C (공식 제품 페이지·설명서)
  • 유효기간 12개월 (설명서)
  • 쓰기 전 실온으로 맞춥니다(설명서).

자료 · 영상

사용법 영상 (Shownin 공식 YouTube)

iPSC 계대Shownin iPSC Product System Usage Protocols: Passaging YouTube에서 보기

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

인용 논문

  1. Human ESC-sEVs alleviate age-related bone loss by rejuvenating senescent bone marrow-derived mesenchymal stem cellsLiangzhi Gong, et al. Journal of Extracellular Vesicles, 2020
  2. Generation of refractory schizophrenia patient-derived induced pluripotent stem cell line UJSi001-AJing Sun, et al. Stem Cell Research, 2020
  3. Establishment of an induced pluripotent stem cell line PUMCHi004-A from a hereditary transthyretin amyloid cardiomyopathy patient with transthyretin (TTR) p.Asp38Asn mutationHe Shan, et al. Stem Cell Research, 2020

제조사가 공식 사이트에 공개한 사용 논문 목록입니다.

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