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hPSC 동결보존 배지 (다능성 줄기세포용)

hPSC Cryopreservation Medium · Cat. No. SN-06-1210

인간 다능성 줄기세포(hPSC) 전용 무혈청 · 동물 유래 성분 무첨가 동결보존 배지입니다. 6-well plate 1 well당 1 mL로 바로 씁니다(설명서).

hPSC Cryopreservation Medium 제품 사진
제품 사진 · Shownin 공식 사이트
Shownin · hPSC · 동결보존 배지
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50 mL
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Shownin 공식 제품 페이지 ↗

개요

hPSC Cryopreservation Medium은 인간 다능성 줄기세포(hPSC) 동결용으로 만든 동결보존 배지입니다. 화학 조성이 명확하고(chemically defined), 혈청이 없으며(serum-free), 동물 유래 성분이 들어 있지 않습니다(xeno-free).

제조사는 동결 과정의 세포 손상을 줄이고 해동 후 생존율을 높이며, hPSC의 다방향 분화능을 장기간 유지하도록 설계했다고 설명합니다. 외래 단백질 성분이 없어 배치 간 품질이 안정적이라고 적고 있습니다(설명서).

바로 쓰는 제형으로, hPSC를 해리한 뒤 이 배지에 재부유해 -80 °C를 거쳐 액체질소에 보관합니다. 공식 페이지 그림은 NcEpic™ hPSC Medium과 Vitronectin 기질에서 배양한 hiPSC를 동결 · 해동한 예입니다.

주요 용도

  • hPSC(hiPSC · hESC) 연구용 동결 보존 · 세포 은행 구축
  • Shownin hPSC 배양 체계(NcEpic™ / NcTarget™ 배지, Vitronectin 기질)와 함께 쓰는 동결 · 해동

특징

  • hPSC 전용 설계 (공식 Features)
  • 동물 유래 성분 무첨가(Xeno-Free), 화학 조성 명확(Chemically Defined), 무혈청 (공식 Features · Overview)
  • 해동 후 세포 생존율 ≥90%, 생세포 회수율 ≥80% (제조사 표기 값. 공식 인포그래픽에 단체표준 T/CSCB 0005-2021 표기가 있으나 시험 조건은 공개되지 않음)
  • 6-well plate 1 well(생세포 2–4 × 10⁶개)을 배지 1 mL에 재부유해 동결 튜브 1개로 동결 (설명서)

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
hPSC Cryopreservation MediumSN-06-121050 mL12–8 °C
형태바로 쓰는 동결보존 배지 (50 mL)
주요 성분 특성무혈청 · 동물 유래 성분 무첨가 · 화학 조성 명확 (제조사 표기)
사용량6-well plate 1 well(생세포 2–4 × 10⁶개)당 1 mL, 1.5/2 mL 동결 튜브 1개 (설명서)
동결 방법서서히 냉각 용기로 -80 °C 하룻밤 → 액체질소 (설명서)

사용 방법

함께 준비할 것

  • hPSC Dissociation Buffer — 동결 전 해리, 2 mL/well, 37 °C 7–8분 (설명서)
  • NcEpic™ hPSC Medium — 해동 후 재부유 · 배양용 hPSC 완전 배지 (설명서)
  • NcTarget™ hPSC Medium — NcEpic™ 대신 쓸 수 있는 hPSC 완전 배지 (설명서)
  • Vitronectin — 해동 세포를 접종할 plate 코팅 (설명서)
  • ROCK Inhibitor-Blebbistatin (10 mM) — 해동 배지에 1:4000 첨가 (설명서)
  • DPBS(칼슘·마그네슘 없음), DMEM/F12 — 세척 · 희석용 일반 시약 (설명서)
  • 1.5/2 mL 동결 튜브, 서서히 냉각 용기 또는 프로그램 냉동기 — 동결 장비 (설명서)

hPSC 동결 (6-well plate 예)

  1. 세포가 약 85% 찼을 때 수확합니다. 보통 1 well에서 생세포 2–4 × 10⁶개, 동결 튜브 1개 분량입니다.
  2. 동결 배지를 4 °C에서 꺼내 실온으로 맞추고 가볍게 흔들어 섞습니다. 1.5/2 mL 동결 튜브를 준비합니다.
  3. 배지를 빼고 DPBS(칼슘·마그네슘 없음) 2 mL/well로 헹군 뒤 빼냅니다.
  4. hPSC Dissociation Buffer 2 mL/well을 넣고 37 °C에서 7–8분 둔 뒤, 해리액을 조심해서 빼냅니다.
  5. 동결 배지 1 mL/well을 넣고 부드럽게 피펫팅한 뒤, plate를 가로·세로로 3번 흔들어 동결 튜브로 옮깁니다.
  6. 서서히 냉각 용기에 넣어 -80 °C에서 하룻밤 두고 다음 날 액체질소로 옮깁니다. 프로그램 냉동기를 써도 됩니다.

hPSC 해동 (6-well plate 예)

  1. Vitronectin 코팅 6-well plate를 생물안전작업대에서 약 1시간 두어 실온(15–30 °C)으로 맞춥니다.
  2. hPSC 완전 배지(NcEpic 또는 NcTarget) 4 mL에 Blebbistatin(10 mM) 1 µL를 넣고(1:4000) 실온으로 맞춥니다. 37 °C 수조에서 데우지 않습니다.
  3. 동결 튜브를 37 °C 수조에서 1분 안에 녹이고, 얼음 결정이 거의 안 보이면 꺼냅니다.
  4. 75% 에탄올로 닦고 15 mL 튜브로 옮긴 뒤 DMEM/F12 10 mL를 한 방울씩 섞으며 넣고 160 × g에서 5분 원심합니다.
  5. 상층액을 버리고 Blebbistatin이 든 완전 배지 4 mL로 재부유합니다(위아래 피펫팅은 피함).
  6. 코팅액을 뺀 2 well에 2 mL씩 접종하고 가로·세로로 흔들어 37 °C · 5% CO₂에서 배양합니다.
  7. 18–24시간 뒤 새 완전 배지로 바꾸고 이후 매일 교체합니다. 자세한 절차는 제품 설명서를 따릅니다.

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

제품 특징 요약 (제조사 인포그래픽)
제품 특징 요약 (제조사 인포그래픽)화학 조성 명확, 무혈청, 동물 유래 성분 무첨가. 동결 · 해동 후 세포 생존율 ≥90%, 생세포 회수율 ≥80%, 해동 후 단백질 발현 변화 없음(제조사 표기). 그림 아래에 「Human induced pluripotent stem cell」 단체표준(T/CSCB 0005-2021) 표기가 있습니다.시험 조건: 제조사가 밝힌 값입니다. 시험 조건(세포주, 동결 세포 수, 해동 후 측정 시점과 방법)은 공개되지 않았습니다.
영문 원문 설명

Clear chemical composition; Serum-free; Animal-derived component free; Cell viability ≥ 90%. After frozen-thawing the cell: Cell viability≥90%; Live cell recovery≥80%; Expression of protein remains unchanged after thawing. * “Human induced pluripotent stem cell” Group Standard (T/CSCB 0005-2021)

출처: 공식 제품 페이지
동결 · 해동한 hiPSC의 형태
동결 · 해동한 hiPSC의 형태hPSC Cryopreservation Medium으로 동결했다가 해동한 hiPSC의 형태입니다. A: 해동 24시간 뒤. B, C: 해동 후 3일째와 계대 후 3일째. Scale bar: 200 µm. 배양 체계: NcEpic™ hPSC Medium(SN-01-0010), 기질: Vitronectin(RP01002).시험 조건: hiPSC, NcEpic™ hPSC Medium + Vitronectin 기질. 위상차 현미경 사진. 세포주·계대 수는 공개되지 않음. 제조사 시험 결과
영문 원문 설명

The Cell morphology of frozen-thawed hiPSC cryopreserved in hPSC Cryopreservation medium. A: the hiPSC Morphology under the microscope in 24 hours after cell thawing; B, C: the hiPSC Morphology of under the microscope on the 3rd day after cell thawing and passaging, respectively. Scale bar: 200 μm. Culture system: NcEpic™ hPSC Medium (SN-01-0010). Substrate: Vitronectin (RP01002).

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • 보관 2–8 °C (공식 제품 페이지 · 설명서 표 1)
  • 유효기간 12개월 (설명서)
  • 사용 전 실온으로 맞추고 가볍게 흔들어 섞습니다 (설명서). DMSO가 바닥에 가라앉을 수 있어 충분히 섞어야 합니다 (NcEpic™ hPSC Medium 설명서)

자료 · 영상

사용법 영상 (Shownin 공식 YouTube)

iPSC 해동Shownin iPSC Product System Usage Protocols: Thawing YouTube에서 보기
iPSC 동결보존Shownin iPSC Product System Usage Protocols: Cryopreservation YouTube에서 보기

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

인용 논문

  1. Establishment of an induced pluripotent stem cell line from a patient with hereditary transthyretin amyloidosis carrying transthyretin (TTR) mutation p.Phe53ValHe Shan, et al. Stem Cell Research, 2020
  2. Establishment of an induced pluripotent stem cell line PUMCHi004-A from a hereditary transthyretin amyloid cardiomyopathy patient with transthyretin (TTR) p.Asp38Asn mutationHe Shan, et al. Stem Cell Research, 2020
  3. Generation of an induced pluripotent stem cell (iPSC) line (THSJTUi001-A) from a Wilson's disease patient harboring a homozygous Arg778Leu mutation in ATP7B geneWang, Shu Hong, et al. Stem Cell Research, 2020

제조사가 공식 사이트에 공개한 사용 논문 목록입니다.

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