견적 문의KR|EN|CN

hPSC-네프론(신장) 분화 키트

hPSC-Nephron Differentiation kit · Cat. No. RP01015

hPSC를 약 18–21일(2D) 또는 15–17일(3D)에 걸쳐 네프론 유사 구조의 신장 세포·신장 오가노이드로 분화시키는 키트입니다.

hPSC-Nephron Differentiation kit 제품 사진
제품 사진 · Shownin 공식 사이트
Shownin · hPSC · 분화 키트
선택Cat. No.판매 단위수량
1 Kit

공급 여부 확인 이 제품은 견적 요청 때 국내 공급 가능 여부를 함께 확인해 드립니다.

견적 요청기술 상담

체크한 품목은 수량과 함께 견적함에 담을 수 있습니다. 가격 · 재고 · 납기는 견적으로 안내합니다.

Shownin 공식 제품 페이지 ↗

개요

hPSC-Nephron Differentiation Kit(RP01015)는 인간 다능성 줄기세포(hPSC)를 신장 오가노이드(Kidney Organoid)로 효율적으로 분화시키도록 만든 키트입니다. 성숙하면 네프론 유사 구조를 보입니다(공식 제품 페이지). 설명서는 분화 산물을 네프론 유사 구조를 이루는 신장 상피세포(renal epithelial cells, REC)로 설명합니다.

Day 0–8은 평면(2D) 배양으로 공통 진행하고, Day 8 이후 평면 배양을 계속하거나(2D) POLY HEMA 코팅 플라스크에서 회전 배양해 3차원(3D) 신장 오가노이드로 만들 수 있습니다(설명서·공정 모식도).

제조사에 따르면 성숙한 오가노이드는 CDH1, LTL, PODXL 등의 특이 표지자를 발현하며, 시험관 내 실험, 약물 스크리닝과 안전성 평가, 질환 동물 모델의 세포 이식 연구에 쓸 수 있습니다(공식 제품 페이지).

주요 용도

  • 신장 오가노이드·네프론 유사 구조 연구
  • 약물 스크리닝 · 안전성 평가
  • 질환 동물 모델의 세포 이식 연구 (공식 제품 페이지 표기)

특징

  • hPSC에서 신장 오가노이드로의 효율적 분화용 (공식 Features)
  • 키트 1개로 Day 8 네프론 전구세포(NPC) 2 × 10⁷개 (설명서)
  • 2D 분화는 24-well plate 1장, 3D 분화는 24-well plate 12 well 분량 (설명서)
  • 2D(Day 18–21) · 3D(Day 15–17) 두 가지 분화 방식 제공 (공정 모식도·설명서)
  • 성숙 구조의 표지자: PODXL, CDH1, LTL (제조사 표기, 공정 모식도)

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
Nephron Differentiation Supplement A (100×)RP01015-A1 mL1-80 °C 또는 -20 °C
Nephron Differentiation Supplement B (100×)RP01015-B1 mL1-80 °C 또는 -20 °C
Nephron Differentiation Supplement C (100×)RP01015-C1.5 mL1-80 °C 또는 -20 °C
Nephron Differentiation Supplement D (100×)RP01015-D1.5 mL1-80 °C 또는 -20 °C
Nephron Differentiation Medium ERP01015-E500 mL12–8 °C

Medium E는 보충제 A–D를 섞는 기저 배지이자, Day 13 이후 성숙 단계에 그대로 쓰는 배지입니다(설명서). 동결한 신장 전구세포를 해동해 이어 분화할 때 쓰는 hPSC-Nephron Cell (Maturation and) Differentiation Medium(RP01015-F: Supplement C·D 각 1.5 mL, Medium E 500 mL)은 설명서에 별도 품목으로 나옵니다.

분화 대상hPSC → 네프론 전구세포(Day 8) → 네프론 유사 구조(2D) 또는 신장 오가노이드(3D)
분화 기간2D 약 18–21일, 3D 약 15–17일 (설명서·모식도)
예상 수율키트당 Day 8 NPC 2 × 10⁷개 (설명서)
분화 기질Matrigel (2D), POLY HEMA 코팅 T25 플라스크 + 15 rpm 회전(3D)
단계 표지자Day 6 후방 중간중배엽 SIX2 / 성숙 PODXL, CDH1, LTL (공정 모식도)

사용 방법

함께 준비할 것

  • NcEpic™ hPSC Medium 또는 NcTarget™ hPSC Medium — 분화 시작 전 hPSC 유지 배양용. 설명서는 Day 0에 hPSC 완전 배지(NcEpic 또는 NcTarget)를 제거하고 분화를 시작한다고 적고 있습니다. 해동 후 5계대 이상 지난 hPSC 사용 권장 (설명서).
  • NcTarget™ hPSC Medium — NcEpic™ 대신 쓸 수 있는 hPSC 배지 (설명서 권장 시약)
  • Corning® Matrigel® Matrix — 분화 단계 배양 기질(코팅). 키트에 없음 (설명서·공정 모식도)
  • hPSC Dissociation Buffer — hPSC 계대용 (설명서 권장 시약)
  • ROCK Inhibitor-Blebbistatin (10 mM) — 설명서 권장 시약
  • DMEM/F12, DPBS(칼슘·마그네슘 없음) — 세척·희석용 일반 시약 (설명서)
  • 0.25% Trypsin Solution · Trypsin Inhibitor (Shownin RP02011 · RP02012) — Day 8 3D 전환 시 세포 해리·중지 (설명서 권장 시약)
  • POLY HEMA, T25 플라스크, 3D 회전 배양기(15 rpm) — 3D 오가노이드 배양 (설명서)
  • Solase — 설명서 권장 시약
  • hPSC Cryopreservation Medium — hPSC 동결용 (설명서 권장 시약)
  • hPSC-Nephron Cell Differentiation Medium (RP01015-F) — 동결 세포 해동 후 이어 분화할 때 (설명서, 별도 품목)

완전 배지 만들기

  1. 보충제 A–D를 4 °C에서 녹입니다(37 °C 금지).
  2. Medium E에 보충제 A/B/C/D(100×)를 1×가 되도록 섞어 완전 배지 A–D를 만듭니다.
  3. 바로 쓰거나 4 °C에서 2주 안에 씁니다.

hPSC 준비 (Day -3)

  1. 24-well plate에 hPSC 3–5 × 10⁴ cells/well로 접종하고 매일 배지를 교체합니다(설명서 Tips: 5 × 10⁴ cells/cm², hPSC 완전 배지 200 µL/cm²).
  2. 해동 후 5계대 이상 지난 hPSC 사용을 권장합니다.

2D 분화 (Day 0 ~ 18/21)

  1. Day 0: hPSC가 50% 차면 hPSC 배지를 빼고 DPBS 500 µL로 1회 세척 → 완전 배지 A 0.5 mL/well, 매일 교체(Day 0–4). 50% 도달 시점에 맞춰 시작일을 조정합니다.
  2. Day 4–6 완전 배지 B, Day 6–8 배지 C, Day 8–10 배지 D, Day 10–13 배지 C — 모두 1 mL/well, 매일 교체. Day 4 무렵 세포가 수축하며, 너무 느슨하거나 촘촘하면 이후 분화 효율에 영향이 있습니다.
  3. Day 13부터 Nephron Differentiation Medium E 1 mL/well, 매일 교체. 약 5–7일 뒤(Day 18–21) 성숙한 네프론 상피 구조를 얻습니다.

3D 분화 (Day 8 ~ 15/17)

  1. Day 0–8은 2D와 같습니다.
  2. Day 8: 완전 배지 D 6 mL에 Blebbistatin 1:1000을 넣어 준비. 24-well 1 well에 0.25% 트립신 500 µL, 37 °C 3분 → 트립신 억제제 500 µL로 중지 → 피펫으로 풀어 5–10초 원심.
  3. Blebbistatin이 든 배지 D로 재부유해 POLY HEMA 코팅 T25 플라스크에 옮기고 3D 회전 배양기 15 rpm에서 배양. 24시간 뒤 Blebbistatin 없는 배지로 바꾸고 매일 교체(Day 8–10).
  4. Day 10–13 완전 배지 C 6 mL, Day 13부터 Medium E 5 mL, 매일 교체. 약 2–4일 뒤(Day 15–17) 구조가 뚜렷한 신장 오가노이드를 얻습니다.

동결 세포 해동 후 이어 분화

  1. 2D: Matrigel 코팅 24-well plate 준비, 완전 배지 C 1 mL에 Blebbistatin 1:2000(최종 5 µM). 37 °C에서 1분 안에 녹여 Medium E 8 mL를 한 방울씩 넣고 150 × g 5분 원심 → 배지 C 1 mL로 1 well에 접종.
  2. 해동 Day 2–4 배지 D, Day 4–7 배지 C, Day 7부터 Medium E — 5–7일 뒤 성숙 신장 상피 구조.
  3. 3D: 배지 C 6 mL + Blebbistatin 1:1000으로 같은 방법으로 해동 → POLY HEMA 코팅 T25, 15 rpm. 해동 Day 1–3 배지 D 6 mL, Day 3–6 배지 C 6 mL, Day 6부터 Medium E 5 mL — 2–4일 뒤 신장 오가노이드.
  4. 자세한 절차는 제품 설명서를 따릅니다.
분화 일정 (공식 공정 모식도 + 설명서)
Day-30–44–66–88–1010–1313 이후
단계(모식도)hPSC 준비→ Day 4 후기 원시선(Late primitive streak)→ Day 6 후방 중간중배엽(SIX2)→ Day 8 후신 간엽(Metanephric mesenchyme)2D 계속 또는 3D 전환→ Day 13 신장 소포(Renal vesicle)2D: Day 18–21 네프론 / 3D: Day 15–17 신장 오가노이드 (PODXL, CDH1, LTL)
배지NcEpic™ / NcTarget™완전 배지 A완전 배지 B완전 배지 C완전 배지 D완전 배지 CMedium E
2D 부피 (24-well)200 µL/cm²0.5 mL/well1 mL/well1 mL/well1 mL/well1 mL/well1 mL/well
3D (Day 8부터)————POLY HEMA T25, 15 rpm, 배지 D 6 mL (+Blebbistatin 첫 24시간)배지 C 6 mLMedium E 5 mL

배지는 매일 교체. 기질은 2D 전 기간 Matrigel(모식도).

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

분화 공정 모식도 (2D · 3D)
분화 공정 모식도 (2D · 3D)Day -3에 NcEpic™/NcTarget™ hPSC Medium으로 hPSC를 준비하고, Day 0–4 배지 A(Day 4 후기 원시선), Day 4–6 배지 B(Day 6 후방 중간중배엽, SIX2), Day 6–8 배지 C(Day 8 후신 간엽), Day 8–10 배지 D, Day 10–13 배지 C(Day 13 신장 소포), 이후 Medium E로 분화합니다. Day 8부터 2D로 계속하면 Day 18–21에 네프론(PODXL, CDH1, LTL)을, POLY HEMA 위 3D로 옮기면 Day 15–17에 신장 오가노이드를 얻습니다. 기질은 Matrigel입니다.
영문 원문 설명

Process

출처: 공식 제품 페이지
2D·3D 분화 중 세포 형태
2D·3D 분화 중 세포 형태A, B, C: 분화 Day 4, 6, 8의 세포 형태. D, E: 2D 분화 Day 14, Day 20의 형태, F: 2D 분화 Day 20 형태 확대. G: 3D 분화 Day 13의 형태, H, I: 3D 분화 Day 17의 형태. Scale bar: 200 µm.시험 조건: 명시야 현미경 사진. 2D는 24-well plate, 3D는 POLY HEMA 코팅 T25 회전 배양(설명서 절차 기준). 제조사 시험 결과
영문 원문 설명

A, B, C: cell morphology on days 4, 6 and 8 during the differentiation process of hPSC-Nephron Differentiation Kit. D, E: cell morphology on days 14 and 20 of 2D differentiation; F: Enlarged illustration of cell morphology on day 20 of 2D differentiation. G: cell morphology on the 13th day of 3D differentiation; H, I: Illustration of the cell morphology on the 17th day of 3D differentiation. Scale bar: 200 μm.

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • 보충제(Supplement) A–D: -80 °C 또는 -20 °C
  • Medium E: 2–8 °C
  • 만든 완전 배지는 2–8 °C(4 °C)에서 최대 2주 (설명서)
  • 보충제는 4 °C에서 녹이고 37 °C에서 녹이지 않습니다. 동결·해동은 2회 이내 (설명서)

자료 · 영상

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

hPSC-Nephron Differentiation kit 견적 · 기술 문의

Cat. No.와 수량, 사용하시는 세포 · 공정을 알려 주시면 국내 공급 조건과 기술 자료를 안내합니다.

견적 · 기술 문의
↑