hPSC-운동 신경세포 분화 키트
hPSC-Motor Neuron Differentiation Kit · Cat. No. RP01018
hPSC를 운동 신경 전구세포(Day 9)를 거쳐 약 30–35일에 성숙 운동 신경세포로 분화시키는 키트입니다. 전구세포 동결 배지 포함.
| 선택 | Cat. No. | 판매 단위 | 수량 |
|---|---|---|---|
| 1 Kit |
1
공급 여부 확인 이 제품은 견적 요청 때 국내 공급 가능 여부를 함께 확인해 드립니다.
체크한 품목은 수량과 함께 견적함에 담을 수 있습니다. 가격 · 재고 · 납기는 견적으로 안내합니다.
개요
hPSC-Motor Neuron Differentiation Kit(RP01018)는 인간 다능성 줄기세포(hPSC)를 운동 신경세포(motor neuron)로 효율적으로 분화시키도록 만든 키트입니다. 공식 페이지 본문은 hiPSC를 대상으로 적고 있으며, 설명서는 hPSC로 적고 있습니다.
분화 과정은 신경상피 전구세포(NEP, Day 0–4), 운동 신경 전구세포(MNP, Day 4–9), 분열 후 운동 신경세포(pMN, Day 9–12), 성숙 운동 신경세포(mMN, Day 12–30/35)의 단계로 진행됩니다(공정 모식도·설명서). Day 9의 전구세포는 키트에 든 Motor Neuron Cryopreservation Medium F로 동결할 수 있습니다.
제조사에 따르면 분화된 운동 신경세포는 CHAT, MAP2, Synaptophysin 등의 특이 표지자를 발현하고 운동 신경세포의 전형적인 전기생리 활성을 보입니다. 시험관 내 연구와 질환 모델 동물의 세포 이식 연구에 쓸 수 있습니다(공식 제품 페이지).
주요 용도
- 운동 신경세포 질환 연구용 세포 모델
- 시험관 내 신경 기능·전기생리 연구
- 질환 모델 동물의 세포 이식 연구 (공식 제품 페이지 표기)
특징
- hPSC에서 운동 신경세포로의 효율적 분화용 (공식 Features)
- 키트 1개로 Day 9 운동 신경 전구세포(MNP) 1 × 10⁷개 (설명서)
- 사용 분량: MNP 분화(Day 0–9) 12-well plate 4 well 또는 6-well plate 2 well, MNP 성숙(Day 9–30) 12-well plate 10 well 또는 24-well plate 20 well (설명서)
- 운동 신경 전구세포 동결 배지(Motor Neuron Cryopreservation Medium F, 20 mL) 포함 (공식 제품 표)
- 성숙 운동 신경세포: CHAT, βIII-Tubulin 면역형광 양성, 패치 클램프에서 자발 발화 확인 (제조사 시험, Day 30)
구성 · 사양
| 구성품 (영문 표기) | Cat. No. | 용량 | 수량 | 보관 |
|---|---|---|---|---|
| Motor Neuron Differentiation Supplement A (20×) | RP01018-A | 1 mL | 1 | -80 °C 또는 -20 °C |
| Motor Neuron Differentiation Supplement B (25×) | RP01018-B | 1 mL | 1 | -80 °C 또는 -20 °C |
| Motor Neuron Differentiation Supplement C (50×) | RP01018-C | 1 mL | 1 | -80 °C 또는 -20 °C |
| Motor Neuron Differentiation Supplement D (50×) | RP01018-D | 1 mL | 3 | -80 °C 또는 -20 °C |
| Motor Neuron Differentiation Basal Medium E | RP01018-E | 250 mL | 1 | 2–8 °C |
| Motor Neuron Cryopreservation Medium F | RP01018-F | 20 mL | 1 | 2–8 °C |
보충제 A–D를 기저 배지 E와 섞어 완전 배지 A–D(1×)로 씁니다. 동결한 전구세포를 해동해 성숙시킬 때 쓰는 Motor Neuron Maturation Medium(RP01018-G: Supplement C 1 mL, Supplement D 3 × 1 mL, Basal Medium E 200 mL)은 설명서에 별도 품목으로 나옵니다.
| 분화 대상 | hPSC → NEP → MNP(Day 9) → pMN → 성숙 운동 신경세포(Day 30–35) |
|---|---|
| 예상 수율 | 키트당 Day 9 MNP 1 × 10⁷개 (설명서) |
| 분화 기질 | Day 9까지 Matrigel, 이후 Matrigel(2배 농도) 또는 Laminin (설명서·모식도) |
| 단계별 표지자 | NEP: PAX6 / MNP: Olig2 / pMN: HB9, ISL1 / mMN: CHAT, MAP2, Synaptophysin (공정 모식도) |
사용 방법
함께 준비할 것
- NcEpic™ hPSC Medium 또는 NcTarget™ hPSC Medium — 분화 시작 전 hPSC 유지 배양용. 설명서는 Day 0에 hPSC 완전 배지(NcEpic 또는 NcTarget)를 제거하고 분화를 시작한다고 적고 있습니다.
- NcTarget™ hPSC Medium — NcEpic™ 대신 쓸 수 있는 hPSC 배지 (설명서 권장 시약)
- Corning® Matrigel® Matrix — 분화 단계 배양 기질(코팅). 키트에 없음 (설명서·공정 모식도)
- hPSC Dissociation Buffer — hPSC 계대용 (설명서 권장 시약)
- ROCK Inhibitor-Blebbistatin (10 mM) — 설명서 권장 시약
- DMEM/F12, DPBS(칼슘·마그네슘 없음) — 세척·희석용 일반 시약 (설명서)
- Solase — Day 0 hPSC 해리, Day 9 MNP 해리 (설명서)
- ncLaminin511 또는 Poly-L-ornithine/Laminin — Day 9 이후 Laminin 코팅 (설명서 권장 시약)
- Motor Neuron Maturation Medium (RP01018-G) — 동결 MNP를 해동해 성숙시킬 때 (설명서, 별도 품목)
- Motor Neuron Electrophysiology Medium (RP01018-H) — 전기생리 기록 전 3일 배양 (설명서에 언급, 공식 페이지에 없음)
- TrypLE — 성숙 신경세포 분석용 해리 (설명서)
완전 배지 만들기
- 보충제 A–D를 4 °C에서 녹입니다(37 °C 금지).
- 기저 배지 E에 보충제 A(20×)/B(25×)/C(50×)/D(50×)를 1×가 되도록 섞어 완전 배지 A–D를 만듭니다.
- 바로 쓰는 것을 권장하며, 4 °C에서 2주 안에 씁니다.
NEP 분화 (Day 0 ~ 4)
- hPSC가 80–90% 차면 hPSC 배지를 빼고 DPBS 2 mL/well로 헹굽니다.
- 미리 데운 Solase 1 mL/well, 37 °C·5% CO₂에서 5–7분 → 1.5 mL 튜브에서 10–15초 원심 → 완전 배지 A 1 mL로 단일세포 재부유 후 계수.
- Matrigel 코팅 6-well plate에 3–5 × 10⁵ cells/well, 완전 배지 A 2 mL(Blebbistatin 10 µM 포함)로 접종하고 십자 방향으로 3번 흔들어 고르게 폅니다.
- 22–24시간 뒤 Blebbistatin 없는 완전 배지 A 2 mL/well로 교체, 이후 매일 교체합니다.
MNP 분화 (Day 4 ~ 9)
- Day 4부터 완전 배지 B 2 mL/well, 매일 교체 (Day 4–9).
pMN 분화 (Day 9 ~ 12)
- Day 9: DPBS로 헹군 뒤 Solase 1 mL/well, 37 °C에서 8–12분(덜 떨어지면 18–20분까지, 20분 초과 금지) → 10–15초 원심 → 완전 배지 C 1 mL로 재부유 후 계수.
- 이 단계의 MNP는 Motor Neuron Cryopreservation Medium F 1 mL에 2 × 10⁶ cells/튜브로 동결할 수 있습니다.
- Matrigel(2배 농도) 또는 Laminin 코팅 12-well plate에 2–6 × 10⁵ cells/well, 완전 배지 C 1 mL/well(Blebbistatin 10 µM)로 접종.
- 22–24시간 뒤 Blebbistatin 없는 배지 C 1 mL/well로 교체, 매일 교체(Day 9–12). 운동 신경세포는 잘 떨어지므로 부드럽게 다룹니다.
성숙 (Day 12 ~ 35)
- Day 12부터 완전 배지 D 1 mL/well로 교체하며 배양합니다(본문은 매일 교체).
- Day 30–35에 성숙 운동 신경세포를 얻어 분석합니다. 전기생리 기록 전에는 Motor Neuron Electrophysiology Medium(RP01018-H)으로 3일 배양합니다.
동결 MNP 해동·성숙
- 완전 배지 C에 Blebbistatin 1:1000(최종 10 µM)을 넣고 실온으로 맞춥니다.
- 37 °C 수조에서 1분 안에 녹이고 DMEM/F12 10 mL를 한 방울씩 넣어 섞은 뒤 178 × g 5분 원심.
- Matrigel 또는 Laminin 코팅 12-well plate에 2–6 × 10⁵ cells/well로 접종 → 22–24시간 뒤 배지 C 1 mL/well로 교체, 3일 배양.
- 해동 Day 3부터 완전 배지 D 1 mL/well, 2일마다 교체. 해동 후 Day 18–23에 성숙 운동 신경세포를 얻습니다.
- 분석용 해리는 TrypLE 37 °C 10–15분(15분 초과 금지), qPCR은 2 × 10⁶개 이상에서 RNA 추출. 자세한 절차는 제품 설명서를 따릅니다.
| Day | -3 | 0–4 | 4–9 | 9 | 9–12 | 12–30/35 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 단계 | hPSC 준비 | 신경상피 전구세포(NEP) | 운동 신경 전구세포(MNP) | 해리·재접종 (동결 가능) | 분열 후 운동 신경세포(pMN) | 성숙 운동 신경세포(mMN) |
| 배지 | NcEpic™ / NcTarget™ | 완전 배지 A (첫날 Blebbistatin 10 µM) | 완전 배지 B | 동결 시 Cryopreservation Medium F | 완전 배지 C (첫날 Blebbistatin 10 µM) | 완전 배지 D |
| 기질 | Matrigel | Matrigel | Matrigel | — | Matrigel(2배) 또는 Laminin | Laminin |
| 표지자 | — | PAX6 | Olig2 | — | HB9, ISL1 | CHAT, MAP2, Synaptophysin |
| 용기·부피 | — | 6-well, 2 mL/well | 6-well, 2 mL/well | — | 12-well, 1 mL/well | 12-well, 1 mL/well |
배지는 매일 교체(설명서 본문). 동결 MNP 해동 후에는 별도 일정(해동 Day 0–3 배지 C, Day 3 이후 배지 D, Day 18–23 성숙).
제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.
제조사 시험 자료
영문 원문 설명
Process
영문 원문 설명
A, B, C: cell morphology on days 9, 12 and 30 during the differentiation process of hPSC-Motor Neuron Differentiation Kit. D, E, F: Immunofluorescence detection of MNP (Day 9) cell-specific markers (Olig2, Tubulin). Scale bar: 200 μm.
영문 원문 설명
G, H, I: Immunofluorescence detection of MN (mature motor neuron) cell-specific markers: CHAT, βIII-Tubulin. J, K, L: Patch-clamp electrophysiological detection results of hPSC-derived mature motor neurons (Day 30). Selecting neurons that meet the morphological characteristics for patch-clamp testing can detect spontaneous firing. Scale bar: 200 μm.
제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.
보관 · 취급
- 보충제(Supplement) A–D: -80 °C 또는 -20 °C
- 기저 배지 E, 동결 배지 F: 2–8 °C
- 만든 완전 배지는 2–8 °C(4 °C)에서 2주 안에 사용 (설명서)
- 보충제는 4 °C에서 녹이고 37 °C에서 녹이지 않습니다. 동결·해동은 2회 이내 (설명서)
자료 · 영상
- PDFhPSC-Motor Neuron Differentiation Kit — Product Manual
hPSC-운동 신경세포 분화 키트 제품 설명서(영문): 제품 정보 · 구성 · 보관 · 사용 절차.
제품 설명서 · 영문 · PDF · 9쪽 · 650 KB · PDF 작성 2026-01-16 · 공식 원문
COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.
함께 쓰는 제품
hPSC-Motor Neuron Differentiation Kit 견적 · 기술 문의
Cat. No.와 수량, 사용하시는 세포 · 공정을 알려 주시면 국내 공급 조건과 기술 자료를 안내합니다.