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hMSC Osteogenic Differentiation Kit (중간엽줄기세포 골세포 분화 키트)

hMSC Osteogenic Differentiation Kit · Cat. No. RP02014-C

인간 중간엽줄기세포(hMSC)를 21일간 골세포로 분화시키는 키트입니다. 기저 배지 80 mL와 보충제 20 mL로 구성됩니다.

hMSC Osteogenic Differentiation Kit 제품 사진
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Shownin · hMSC · 분화 키트
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1 Kit (100 mL)

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개요

hMSC Osteogenic Differentiation Kit는 인간 중간엽줄기세포(hMSC)를 골세포 계통으로 효율적으로 분화시키도록 만든 키트입니다.

분화용 기저 배지(Osteogenic Differentiation Basal Medium)와 분화 보충제(Osteogenic Differentiation Supplement)로 구성되며, 여러 조직에서 얻은 MSC의 골 분화에 사용할 수 있습니다. 설명서는 6-well plate에서 21일 분화시킨 뒤 Alizarin Red로 칼슘 침착을 염색해 확인하는 방법을 안내합니다.

주요 용도

  • hMSC의 골세포 분화 유도
  • MSC 특성 확인을 위한 3계통 분화능 시험

특징

  • 여러 조직 유래 MSC의 골세포 분화 지원 (공식 제품 페이지)
  • 약 85% 컨플루언스에서 분화를 시작해 21일 배양, Alizarin Red 염색으로 확인 (설명서)
  • 분화 21일째 염색 전후 사진 공개 (공식 제품 페이지 그림)

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
Osteogenic Differentiation Basal MediumRP02014-C-0180 mL12–8 °C
Osteogenic Differentiation SupplementRP02014-C-0220 mL1-80 °C ~ -20 °C

기저 배지와 보충제를 섞어 완전 분화 배지로 사용합니다.

형태분화 기저 배지 + 분화 보충제 2종 구성 (공식 제품 페이지)
대상 세포인간 중간엽줄기세포(hMSC), 여러 조직 유래
분화 방향골세포(osteoblast 계통)
분화 기간21일 (설명서)

사용 방법

함께 준비할 것

  • NcMission™ hMSC Medium V3.0 — 분화 전 hMSC 배양·대조군 배지 (설명서 권장)
  • 2% Alizarin Red S 용액 — 칼슘 침착 염색 (설명서)
  • 4% 파라포름알데히드(PFA), DPBS (Ca²⁺/Mg²⁺ 없음) — 고정·세척 (설명서)
  • Matrigel 코팅 플레이트 — 세포 탈락 방지용 권장 (설명서)
  • 6-well plate, 피펫, 15·50 mL 원심분리 튜브 — 설명서 권장 소모품

완전 분화 배지와 염색액 만들기

  1. Osteogenic Differentiation Supplement를 4 °C에서 녹입니다(37 °C에서 녹이지 않음).
  2. 생물안전작업대에서 Basal Medium과 Supplement를 섞어 완전 분화 배지 100 mL를 만듭니다. 혼합량은 제품과 함께 받은 최신 설명서를 따릅니다.
  3. 완전 배지는 4 °C에 두고 2주 안에 씁니다.
  4. Alizarin Red 염색액: 2% 원액(실온 보관)을 탈이온수로 1:20 희석해 0.1% 작업액을 만듭니다(연갈색 투명액).

MSC 준비

  1. hMSC를 NcMission™ hMSC Medium V3.0으로 배양합니다(자세한 내용은 그 제품 설명서).
  2. 6-well plate에 5000–10000 cells/cm²로 접종하고 십자 방향으로 3번 흔들어 37 °C, 5% CO₂에서 배양합니다.

골 분화와 확인

  1. 세포가 약 85% 컨플루언스가 되면 배지를 빼고 두 군으로 나눠, 한 군에는 골 분화 완전 배지, 다른 군(대조군)에는 NcMission™ hMSC Medium V3.0을 넣습니다.
  2. 분화 중 세포 가장자리가 말리거나 떨어지는 것을 막으려면 Matrigel로 코팅한 플레이트를 권장합니다.
  3. 3–4일마다 웰당 2–3 mL씩 배지를 갈아 주며 21일째까지 배양합니다.
  4. 21일째 상등액을 빼고 4% PFA로 30분 고정합니다.
  5. Alizarin Red 작업액을 넣고 실온·빛 차단 상태에서 20–60분 염색한 뒤, 생리식염수나 DPBS로 여러 번 씻고 담가 둔 채 현미경으로 관찰합니다.
  6. 자세한 절차는 제품 설명서를 따릅니다.

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

골 분화 과정의 세포 형태와 21일째 염색
골 분화 과정의 세포 형태와 21일째 염색hMSC Osteogenic Differentiation Kit로 분화시키는 동안의 세포 형태입니다. A, B: 분화 0일째와 21일째 염색 전 세포 형태. C: 분화 21일째 염색 후 모습(칼슘 침착이 붉게 염색됨). Scale bar: 200 μm.시험 조건: hMSC, 분화 0일·21일째. 설명서 절차상 Alizarin Red 염색. 세포 유래 조직·계대는 미기재 (제조사 시험 결과)
영문 원문 설명

The morphology during the differentiation process of hMSC Osteogenic Differentiation Kit. A, B, and C: Cell morphology before staining on days 0 and 21 of differentiation, and after staining on day 21, respectively. Scale bar: 200 μm.

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • Basal Medium 2–8 °C, Supplement -80 °C ~ -20 °C (공식 제품 페이지)
  • 완전 분화 배지는 2–8 °C에서 2주 안에 사용 (설명서)
  • Supplement는 4 °C에서 녹이고 37 °C에서 녹이지 않습니다. 냉동·해동은 2회를 넘기지 않습니다 (설명서)

자료 · 영상

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

인용 논문

  1. Changes in the hepatic differentiation potential of human mesenchymal stem cells aged in vitroSang Luo, et al. Annals of Translational Medicine, 2022

제조사가 공식 사이트에 공개한 사용 논문 목록입니다.

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