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hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit (중간엽줄기세포 연골세포 분화 키트)

hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit · Cat. No. RP02014-B

인간 중간엽줄기세포(hMSC)를 펠릿(pellet) 배양으로 연골세포로 분화시키는 키트입니다. 기저 배지 80 mL와 보충제 20 mL로 구성됩니다.

hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit 제품 사진
제품 사진 · Shownin 공식 사이트
Shownin · hMSC · 분화 키트
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1 Kit (100 mL)

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개요

hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit는 인간 중간엽줄기세포(hMSC)를 연골세포 계통으로 효율적으로 분화시키도록 만든 키트입니다.

분화용 기저 배지(Chondrogenesis Differentiation Basal Medium)와 분화 보충제(Chondrogenesis Differentiation Supplement)로 구성되며, 여러 조직에서 얻은 MSC의 연골 분화에 사용할 수 있습니다. 설명서는 원심분리 튜브에서 세포 덩어리(펠릿)를 만들어 10–20일 분화시킨 뒤 동결 절편을 Alcian Blue로 염색해 확인하는 방법을 안내합니다.

주요 용도

  • hMSC의 연골세포 분화 유도
  • MSC 특성 확인을 위한 3계통 분화능 시험

특징

  • 여러 조직 유래 MSC의 연골세포 분화 지원 (공식 제품 페이지)
  • 펠릿 배양: 튜브당 2 × 10⁵ cells로 펠릿을 만들어 10–20일 분화, 14일이면 연골 형성에 충분 (설명서)
  • 분화 14일째 펠릿 절편의 염색 사진 공개 (공식 제품 페이지 그림)

구성 · 사양

구성
구성품 (영문 표기)Cat. No.용량수량보관
Chondrogenesis Differentiation Basal MediumRP02014-B-0180 mL12–8 °C
Chondrogenesis Differentiation SupplementRP02014-B-0220 mL1-80 °C ~ -20 °C

기저 배지와 보충제를 섞어 완전 분화 배지로 사용합니다.

형태분화 기저 배지 + 분화 보충제 2종 구성 (공식 제품 페이지)
대상 세포인간 중간엽줄기세포(hMSC), 여러 조직 유래
분화 방향연골세포(chondrocyte), 펠릿 배양
분화 기간10–20일 (14일이면 충분, 설명서)

사용 방법

함께 준비할 것

  • NcMission™ hMSC Medium V3.0 — 분화 전 hMSC 배양·펠릿 형성 (설명서 권장)
  • TrypLE (0.5×로 희석해 사용) — 펠릿 형성 전 해리 (설명서)
  • Alcian Blue 8GX 염색 용액 — 연골 기질 염색 (설명서)
  • 4% PFA 용액, DPBS (Ca²⁺/Mg²⁺ 없음) — 고정·세척 (설명서)
  • 동결 절편용 포매제·절편기, 슬라이드 — 펠릿 절편 제작 (설명서)
  • 6-well plate, 15 mL 원심분리 튜브, 피펫 — 설명서 권장 소모품

완전 분화 배지 만들기

  1. Chondrogenesis Differentiation Supplement를 4 °C에서 녹입니다(37 °C에서 녹이지 않음).
  2. 생물안전작업대에서 Basal Medium과 Supplement를 섞어 완전 분화 배지 100 mL를 만듭니다. 혼합량은 제품과 함께 받은 최신 설명서를 따릅니다.
  3. 완전 배지는 4 °C에 두고 2주 안에 씁니다. 보관·사용 중 빛을 피합니다.

MSC 준비

  1. hMSC를 NcMission™ hMSC Medium V3.0으로 배양합니다(자세한 내용은 그 제품 설명서).
  2. 6-well plate에 5,000–10,000 cells/cm²로 접종하고 십자 방향으로 3번 흔들어 37 °C, 5% CO₂에서 배양합니다.

펠릿 만들기 (약 80% 컨플루언스)

  1. 웰당 0.5× TrypLE 1 mL로 37 °C에서 3분 해리합니다.
  2. 250 × g 5분 원심분리(가속 3, 감속 7) 후 NcMission hMSC Medium에 풀어 셉니다.
  3. 15 mL 튜브에 2 × 10⁵ cells씩 옮깁니다(군당 2개). 1 mL보다 적으면 NcMission hMSC Medium으로 1 mL를 맞추고 실온 300 × g 5분 원심분리합니다.
  4. 상등액을 빼고 튜브를 가볍게 두드려 펠릿을 푼 뒤 튜브당 완전 배지 1 mL에 풀어 실온 450 × g 10분 원심분리합니다.
  5. 뚜껑을 느슨하게 하고 37 °C, 5% CO₂에서 16시간(하룻밤) 둡니다.

연골 분화 유도와 확인

  1. 1일째: 펠릿이 흩어지지 않게 NcMission hMSC Medium을 빼고, 연골 분화 완전 배지를 튜브당 2 mL씩 벽을 따라 천천히 넣습니다.
  2. 10–20일 배양하며 2일마다 튜브당 2 mL씩 배지를 갈아 줍니다(14일이면 연골 형성에 충분).
  3. 고정: DPBS 2 mL로 씻고 4% PFA 2 mL로 25 °C에서 10분 고정합니다.
  4. 동결 절편: 포매제에 묻어 10 μm 두께로 자릅니다(포매 시료는 -80 °C에서 최대 2개월 보관).
  5. DPBS로 10분씩 2회 씻고 말린 뒤 Alcian Blue 8GX 용액으로 37 °C 습윤 상자에서 30분 염색합니다.
  6. 흐르는 물로 3분 헹구고(시료에 물줄기가 직접 닿지 않게) 말려 현미경으로 관찰합니다.
  7. 자세한 절차는 제품 설명서를 따릅니다.

제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.

제조사 시험 자료

연골 분화 14일째 펠릿 염색
연골 분화 14일째 펠릿 염색hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit로 분화시킨 세포의 형태입니다. A, B, C: 분화 14일째 염색 후 세포 형태(같은 펠릿을 점점 높은 배율로 본 사진). Scale bar: 200 μm.시험 조건: hMSC 펠릿, 분화 14일째. 설명서 절차상 펠릿 동결 절편(10 μm)을 Alcian Blue 8GX로 염색. 세포 유래 조직·계대는 미기재 (제조사 시험 결과)
영문 원문 설명

The morphology during the differentiation process of hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit. A, B, C: Cell morphology after staining on day 14 of differentiation, respectively. Scale bar: 200 μm.

출처: 공식 제품 페이지

제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.

보관 · 취급

  • Basal Medium 2–8 °C, Supplement -80 °C ~ -20 °C (공식 제품 페이지)
  • 완전 분화 배지는 2–8 °C에서 2주 안에 사용 (설명서)
  • Supplement는 4 °C에서 녹이고 37 °C에서 녹이지 않습니다. 냉동·해동은 2회를 넘기지 않습니다 (설명서)

자료 · 영상

COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.

hMSC Chondrogenesis Differentiation Kit 견적 · 기술 문의

Cat. No.와 수량, 사용하시는 세포 · 공정을 알려 주시면 국내 공급 조건과 기술 자료를 안내합니다.

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