NK · 면역세포 · 배양 배지
ncKnight™ NK 확장용 기저 배지 세트
ncKnight™ NK Expansion Basal Medium
Cat. No. SN-03-0020공급 여부 확인
ncKnight™ NK 세포 확장 인자 키트
ncKnight™ NK Expansion Factor Kit · Cat. No. SN-03-0030
말초혈액·제대혈 유래 NK 세포를 확장 배양하는 키트입니다. PBMC 1–2 × 10⁷개로 2 L 배양 13–14일 후 NK 세포 5–7 × 10⁹개 수확(제조사 시험).
Shownin · NK · 면역세포 · 배양 배지
| 선택 | Cat. No. | 판매 단위 | 수량 |
|---|---|---|---|
| 1 Kit |
1
체크한 품목은 수량과 함께 견적함에 담을 수 있습니다. 가격 · 재고 · 납기는 견적으로 안내합니다.
개요
ncKnight™ NK Expansion Factor Kit(SN-03-0030)는 사람 자연살해세포(NK 세포, natural killer cell)를 확장 배양하기 위한 키트입니다. 사람 말초혈액과 제대혈에서 얻은 NK 세포를 효율적으로 확장할 수 있습니다. 제조사는 이 제품을 성분이 정의된 사이토카인 기반 배양 시스템(defined, cytokine-only culture system)이라고 설명합니다.
NK 세포가 약 10%인 말초혈액 단핵세포(PBMC)에서 시작하면 14–15일 안에 NK 세포를 5,000–10,000배로 늘릴 수 있다고 제조사는 밝히고 있습니다. 확장된 세포 집단의 CD3⁻CD56⁺ 비율은 80–95% 이상입니다(제조사 표기).
설명서 절차에서는 키트 구성품 외에 IL-2(200 IU/mL)와 자가 혈장(autologous plasma) 또는 사람 혈소판 용해물(human platelet lysate, hPL)을 배양 단계에 따라 5% 또는 1%(v/v)로 따로 더합니다. 필요한 재료는 아래 '함께 필요한 것'을 확인하세요.
주요 용도
- 사람 말초혈액 유래 NK 세포(PB-NK)의 체외 확장 배양
- 사람 제대혈 유래 NK 세포(UCB-NK)의 체외 확장 배양
- 신선 또는 동결 PBMC에서 시작하는 NK 세포 배양
특징
- 적은 채혈량: 말초혈액 10–20 mL로 NK 확장 1회를 진행할 수 있습니다(제조사 표기).
- 적은 시작 세포 수: 단핵세포 5 × 10⁶–1.5 × 10⁷개로 확장을 시작할 수 있습니다(제조사 표기).
- 높은 확장 배수: 14일에 NK 세포 5,000–10,000배 확장(제조사 표기, PBMC 중 NK 세포 비율 약 10% 기준으로 계산).
- 높은 순도: 확장된 NK 세포의 CD3⁻CD56⁺ 비율 80–95% 이상(제조사 표기).
- 1회 수확량: 신선 또는 동결 PBMC 1–2 × 10⁷개로 시작해 2 L 배양 시스템에서 13–14일 확장 후 NK 세포 5–7 × 10⁹개를 한 번에 수확(공식 제품 페이지의 제조사 시험 결과).
구성 · 사양
| 구성품 (영문 표기) | Cat. No. | 용량 | 수량 | 보관 |
|---|---|---|---|---|
| ncKnight™ NK Medium Basal Medium | SN-03-0022 | 1000 mL | 2 | 2–8 °C |
| ncKnight™ NK Medium Supplement | SN-03-0021 | 40 mL | 2 | -80 °C ~ -20 °C |
| ncKnight™ NK Expansion Factor A | SN-03-0031 | 270 µL | 1 | |
| ncKnight™ NK Expansion Factor B | SN-03-0032 | 120 µL | 1 |
키트로만 판매하며 구성품은 따로 팔지 않습니다(설명서 표기).
| 대상 세포 | 사람 말초혈액·제대혈 유래 NK 세포 |
|---|---|
| 시작 재료 | PBMC(단핵세포) 5 × 10⁶–1.5 × 10⁷개, 말초혈액 10–20 mL 분량 (제조사 표기) |
| 배양 규모 | 설명서 2 L 배양 절차가 Expansion Factor A 270 µL, B 120 µL(키트 전량)를 사용, 1 L 절차는 그 절반 |
| 배양 기간 | 14–15일 (공식 제품 페이지), 수확 14–16일 (설명서) |
| 순도 지표 | CD3⁻CD56⁺ 80–95% 이상 (제조사 표기) |
사용 방법
함께 준비할 것
- IL-2 200 IU/mL — NK 완전 배지 조제 시 별도 첨가 (설명서)
- 자가 혈장(autologous plasma) 또는 사람 혈소판 용해물(hPL) — Day 0–7은 5%(v/v), Day 8–15는 1%(v/v)로 배지에 첨가 (설명서)
- 밀도 구배 분리액 (설명서 예: Ficoll-Paque PLUS) — PBMC 분리용 (설명서)
- NK-MAX Purification Factor — 선택. 확장 후 NK 순도를 높이기 위한 혈액 전처리 (설명서 권장 품목)
- Lymphocyte Cryopreservation Medium — 선택. PBMC 동결 보관용 (설명서 권장 품목)
- T25 또는 T75 플라스크, T175/T225 플라스크, 배양 백 — 배양 규모에 따라 (설명서 표 4)
자가 혈장 분리 (선택)
- 신선한 혈액을 900 × g에서 20분 원심분리합니다(가속·감속은 가장 느리게).
- 위층의 노란 혈장을 50 mL 튜브로 옮깁니다. 남은 혈구층은 단핵세포 분리에 씁니다.
- 혈장을 56 °C 수조에서 30분 두어 불활성화한 뒤 1200 × g에서 10분 원심분리해 침전물을 없앱니다.
- 불활성화한 혈장을 새 50 mL 튜브에 옮겨 4 °C에 보관합니다.
NK-MAX Purification Factor 전처리 (선택, 확장 후 NK 순도 향상)
- 혈액 1 mL당 NK-MAX Purification Factor 12.5 µL를 넣은 새 튜브에 혈액을 담고 부드럽게 섞습니다.
- 실온에서 20분 반응시킨 뒤 Ficoll-Paque PLUS로 PBMC를 분리합니다.
PBMC 준비
- Ficoll-Paque PLUS를 이용한 밀도 구배 원심분리로 사람 전혈에서 PBMC를 분리합니다.
- 분리한 PBMC는 바로 NK 확장에 쓰거나 Lymphocyte Cryopreservation Medium(SN-06-1410)으로 동결 보관할 수 있습니다.
NK 완전 배지(NK Complete Medium) 만들기
- ncKnight™ NK Medium Basal Medium 1000 mL에 ncKnight™ NK Medium Supplement 40 mL와 IL-2(최종 200 IU/mL)를 섞습니다.
PBMC에서 NK 세포 확장
- Day 0 (2 L 배양): PBMC를 5%(v/v) 자가 혈장 또는 hPL을 더한 NK 완전 배지에 1 × 10⁶ cells/mL로 총 10 mL(PBMC 1 × 10⁷개) 현탁해 T75 플라스크에 넣고, Expansion Factor A 270 µL와 B 120 µL를 더합니다. 37 °C, 5% CO₂에서 3일 배양합니다.
- Day 0 (1 L 배양): 같은 방법으로 총 5 mL(PBMC 5 × 10⁶개)를 T25 플라스크에 넣고, Factor A 135 µL와 B 60 µL를 더해 3일 배양합니다.
- Day 3–7: 5%(v/v) 자가 혈장 또는 hPL을 더한 NK 완전 배지를 추가해, 추가 후 세포 밀도가 1.0 × 10⁶ cells/mL가 되게 합니다.
- Day 8–15: 1%(v/v) 자가 혈장 또는 hPL을 더한 NK 완전 배지를 추가해, 추가 후 세포 밀도가 1.0 × 10⁶ cells/mL가 되게 합니다. 배지 추가량은 아래 표를 참고합니다.
- 수확: 14–16일 배양 후 세포 밀도가 2–3 × 10⁶ cells/mL에 이르면 200 × g에서 10분 원심분리해 NK 세포를 거둡니다.
- 자세한 절차는 제품 설명서를 확인하세요.
| 구분 | D0 | D3 | D4 | D5 | D6 | D7 | D8 | D9 | D10 | D11 | D12 | D13 | D14 | D15 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 2 L 배양 부피 (mL) | 10 | 10 | 15 | 20 | 35 | 70 | 150 | 300 | 450 | 600 | 1000 | 1600 | 2000 | 2000 |
| 1 L 배양 부피 (mL) | 5 | 5 | 7 | 10 | 17 | 35 | 70 | 150 | 225 | 300 | 500 | 800 | 1000 | 1000 |
배양 용기는 2 L 배양이 T75 플라스크 → T175/T225 플라스크 → 배양 백(culture bag), 1 L 배양이 T25 플라스크 → T175/T225 플라스크 → 배양 백 순서로 바뀝니다. 용기를 바꾸는 날짜는 설명서 원본 표를 확인하세요.
제품 설명서의 절차를 한국어로 요약했습니다. 실제 작업은 제품 설명서 원문과 소속 기관의 절차를 따르세요.
제조사 시험 자료
영문 원문 설명
*All samples started with 10–20 million fresh/frozen PBMCs, using the ncKnight™ NK Expansion Factor Kit. After 13–14 days of expansion in a 2 L culture system, 5–7 billion NK cells can be harvested in a single collection.
제조사가 공개한 시험 결과입니다. 표시한 시료 · 조건에서 얻은 값이며, 사용하시는 세포 · 공정에서 같은 결과를 보장하지 않습니다.
보관 · 취급
- Basal Medium: 2–8 °C
- Supplement: -80 °C ~ -20 °C
- Expansion Factor A·B의 보관 온도는 공식 표에 따로 적혀 있지 않습니다. 제품 라벨과 COA를 확인하세요.
자료 · 영상
- PDFncKnight™ NK Expansion Factor Kit — Product Manual
ncKnight™ NK 세포 확장 인자 키트 제품 설명서(영문): 제품 정보 · 구성 · 보관 · 사용 절차.
제품 설명서 · 영문 · PDF · 3쪽 · 164 KB · PDF 작성 2026-01-19 · 공식 원문
- PDFShownin Product System for NK Cells (브로셔)
NK 세포 제품 구성(채혈 → 정제 → 확장 → 동결보존), ncKnight™ · NK-MAX · 림프구 동결보존 배지의 특징과 시험 결과 4쪽.
브로셔 · 영문 · PDF · 4쪽 · 4,516 KB · PDF 작성 2026-06-18
사용법 영상 (Shownin 공식 YouTube)
COA(시험성적서)는 제품 라벨의 REF(품목코드) · LOT(로트)로 Shownin 공식 COA 조회에서 찾거나 비투바이오에 요청해 주세요. 모든 Shownin 자료는 Shownin 자료실에 있습니다.
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