요점
- 마이코플라스마는 세포벽이 없어 0.2 µm 필터를 통과할 수 있고, 오염되어도 배지가 탁해지지 않아 정해진 검사로만 확인됩니다.
- 공정서 배양법은 약 28일이 걸려, 보관 기간이 짧은 세포치료제에는 qPCR(NAT)을 많이 검토합니다.
- 개정 EP 2.6.7(2026-04-01 시행)은 배양법을 대신하는 NAT에 10 CFU/mL 이하 검출한계와 내부·양성·음성 대조군, 제품 매트릭스 검증을 요구합니다.
배양법과 qPCR 비교
| 항목 | 배양법 | qPCR (NAT) |
|---|---|---|
| 찾는 것 | 자라는 마이코플라스마 | 마이코플라스마 DNA |
| 결과까지 | 약 28일 | 훨씬 짧음 (배양 단계 없음) |
| EP 2.6.7 검출한계 요구 | — | 배양법 대체 10 CFU/mL 이하, 지시세포법 대체 100 CFU/mL |
| 밸리데이션 | 배지 성능 확인 | 특이성·검출한계(24회 반복, 95% 이상 양성)·강건성·비교성 |
전처리와 표준물질
qPCR 감도는 증폭 시약만으로 정해지지 않습니다. 세포·혈청·단백질이 많은 시료에서 적은 양의 마이코플라스마 DNA를 얼마나 잘 뽑아내느냐가 결과를 좌우하므로, 추출 키트와 검출 키트를 한 묶음으로 검증하는 것이 좋습니다.
MycoSHENTEK® Mycoplasma DNA Detection Kit (2G)는 마이코플라스마·스피로플라스마·아콜레플라스마 DNA를 찾는 qPCR 키트로, DNA Extraction Kit (2G)와 함께 씁니다. 제조사가 밝힌 검출한계는 10 CFU/mL이고 내부·양성 대조군이 들어 있습니다. 감도 표준물질은 불활성화한 M. orale · M. pneumoniae · M. hyorhinis를 튜브당 10 CFU로 담아, 시료에 섞어 검출한계와 강건성을 확인하는 데 씁니다.
고르는 순서
- 용도를 정합니다 — 출하 시험 대체인지, 공정 중 확인인지.
- 맞출 공정서(EP·USP·JP)와 그 판의 요구를 확인합니다.
- 시료 매트릭스(세포 밀도, 혈청·단백질)를 정리하고, 추출 키트와 검출 키트를 한 묶음으로 검증합니다.
- 검출한계·강건성 시험에 쓸 감도 표준물질(불활성화 M. orale · M. pneumoniae · M. hyorhinis, 튜브당 10 CFU)을 준비합니다.
- 키트 표시(연구용, RUO)와 제조사 자료 범위를 사내 밸리데이션 계획과 맞춰 봅니다.
- 장비를 확인합니다 — 제조사 설명서에 따르면 DNA 추출은 손으로 하거나 rHCDpurify® 샘플 전처리 시스템으로 자동화할 수 있고, 검출 키트는 SHENTEK® 96S 리얼타임 PCR 장비에서도 쓸 수 있습니다.
자주 묻는 질문
MycoSHENTEK 키트는 무엇을 찾나요?
마이코플라스마·스피로플라스마·아콜레플라스마 DNA를 qPCR로 찾습니다. 짝 키트인 DNA Extraction Kit (2G)와 함께 쓰며, 제조사가 밝힌 검출한계는 10 CFU/mL입니다.
감도 표준물질로 배양법도 할 수 있나요?
아닙니다. 불활성화되어 있어 NAT 검증용으로만 씁니다.
바로 출하 시험에 쓸 수 있나요?
상용 키트라도 우리 제품 매트릭스에서 밸리데이션해야 하고, 출하 시험을 바꾸려면 배양법과의 비교 자료가 필요합니다. 필요한 제조사 자료를 품목별로 확인해 드립니다.
Shentek은 어떤 회사인가요?
Shentek(Huzhou Shenke Biotechnology)은 바이오의약품 QC용 키트와 장비를 만드는 회사로, 잔류 숙주세포 DNA·RNA·HCP 정량, 마이코플라스마 검출, 복제 가능 바이러스 시험 등 공정 불순물·안전성 시험 제품을 갖추고 있습니다. 비투바이오는 Shentek의 한국 독점 대리점입니다.
Shentek(Huzhou Shenke Biotechnology)은 바이오의약품 QC용 키트와 장비를 만드는 회사로, 잔류 숙주세포 DNA·RNA·HCP 정량, 마이코플라스마 검출, 복제 가능 바이러스 시험 등 공정 불순물·안전성 시험 제품을 갖추고 있습니다. 비투바이오는 Shentek의 한국 독점 대리점입니다.
